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愈傷組織的誘導Hill(1967)最早報道從雜交茶香月季(hybridtearose)的莖上誘導了愈傷組織,該實驗證明在培養(yǎng)基中添加2,4-D或添加NAA和激動素KT均能很快誘導出愈傷組織。隨后不同實驗以不同品種為試驗材料,從葉、葉柄、根、莖、原生質體、合子胚、花藥、子房、花瓣、花萼、和花托成功地誘導了愈傷組織。 愈傷組織的成功誘導與品種的基因型有關?搖Lloyd等(1988)曾研究Roseprsica與xanthina,hybrida,Clarissa,Rcabrosa的愈傷發(fā)生能力,發(fā)現(xiàn)只有Rosepersica與xanthina在MS基本培養(yǎng)基上,添加低濃度的BAP和NAA時,節(jié)間能產(chǎn)生愈傷,愈傷組織脆弱,呈淡黃綠色。Kunitake等(1993)研究了RoserugosaThunb,Rosemultiflora,Roseallbacv,SemiplenaRosehybridacv,DuplesRoseharisonii,Rosespinosissi的未成熟種子的愈傷發(fā)生能力,發(fā)現(xiàn)只有RoserugosaThurb能產(chǎn)生愈傷組織,品種Rontl和Soraya比品種Baccara和Mercedes更易產(chǎn)生愈傷(Kintzios等,1999)。 外植體類型?搖Aren等(1993)詳細地調查了RosehybridacvMeirutral不同外植體的愈傷誘導率,發(fā)現(xiàn)不同外植體愈傷產(chǎn)生的能力不同,葉為90%,根為70%,節(jié)間為55%,花藥為19%。 激素激素也是影響愈傷生成的重要因素,Rout等(1991)以Landora為材料,在添加BA和NAA,2,4-D的MS的培養(yǎng)基上,外植體在接種的7~12d后,在近軸面的葉柄和中脈處產(chǎn)生愈傷,愈傷組織誘導頻率高達92%。在接種后15~20d,外植體莖切端處產(chǎn)生愈傷,誘導率為76%。生長素種類和濃度對愈傷產(chǎn)生能力的影響同樣很大。早期實驗多采用NAA結合BAP或BA等,近年來多采用2,4—D,并證明2,4—D是誘導愈傷的必要因素(Kintzios等,1999;Rout等,1996;vanderSalm等,1996;Vises—suwan等,1997)。進一步研究發(fā)現(xiàn)2,4-D對愈傷的誘導效果依賴于月季的基因型,如2,4—D濃度從113umol/L增加到181umol/L降低了Rosehybrida栽培種“Care-freeBeauty”的愈傷誘導頻率,但該濃度則對另一個品種“GrandGala”無影響。對于“RedSunblaze”而言,當濃度從113umol/L增加到452umol/L,則表現(xiàn)出愈傷的誘導率提高了,隨后當2,4—D再增加,則顯著地降低愈傷的誘導頻率。愈傷組織在誘導愈傷組織的培養(yǎng)基上能得到很好繼代培養(yǎng)(subculture、Li等,2002)。VanderSalm等(1996)證明2,4—D對誘導Rosepersica與xanthina和Moneyway產(chǎn)生愈傷是非常必要的,進一步添加低濃度的BA有正效應,但如BA濃度過高,則產(chǎn)生抑制作用。與以上實驗結果不同,Kintzios等(1999)則發(fā)現(xiàn)2,4—D對愈傷誘導有負影響作用,可能因為采用的外植體是成熟的葉片。 合子胚的發(fā)育時期對愈傷的形成能力也有影響?搖如處于心形胚的合子胚,其愈傷誘導率只有2%,子葉胚時的合子胚愈傷誘導率達到85%。( 佚名)
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