貝類(lèi)多倍體育種技術(shù)方法分類(lèi)

中華園林網(wǎng)　 2006-11-23 　　

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化學(xué)法　　主要是利用一些能夠抑制細(xì)胞分裂的化學(xué)物質(zhì)(即化學(xué)誘導(dǎo)劑)來(lái)干預(yù)細(xì)胞正常的分裂過(guò)程，達(dá)到預(yù)期的目的。主要的誘導(dǎo)劑有：細(xì)胞松弛素B(cytochatginB，簡(jiǎn)稱(chēng)CB)：真菌的一類(lèi)代謝產(chǎn)物。CB處理可誘發(fā)一系列細(xì)胞學(xué)效應(yīng)，如細(xì)胞骨架的變化、多核化、破壞微絲等。一般認(rèn)為CB特異性破壞微絲，最終導(dǎo)致細(xì)胞分裂的由微絲構(gòu)成的收縮環(huán)解體，抑制細(xì)胞質(zhì)分裂，阻止極體的釋放，從而產(chǎn)生多倍體。CB是一種致癌劑，水溶性較差，一般溶解在1％的二甲基亞礬(DM鄄SO)中，而且處理結(jié)束后需用含1DMSO的海水浸洗受精卵，去除殘留的CB。6—二甲基氨基嘌呤(6—dimethylaminopurine，簡(jiǎn)稱(chēng)6—DMAP)：嘌呤霉素的一種類(lèi)似物，抑制蛋白質(zhì)磷酸化，通過(guò)作用于特定的酶，破壞微管的聚合中心，使微管不能形成，從而抑制極體的形成和釋放。6—DMAP無(wú)致癌性，具水活性。　　咖啡因(Caffeine)：其作用效果在于提高細(xì)胞內(nèi)的Ca2+。由于微管對(duì)Ca2+濃度敏感，當(dāng)Ca2+濃度極低或高于10時(shí)，會(huì)引起微管二聚體的解聚，阻止細(xì)胞分裂，從而形成多倍體。　　秋水仙素(Colchicine)：能抑制微管的組裝，使已有的微管解聚，從而阻止紡錘體的形成或破壞已形成的紡錘體，使細(xì)胞的染色體加倍而不分離。該種誘導(dǎo)劑在植物中的應(yīng)用較為廣泛且成功，在貝類(lèi)及其他動(dòng)物中的應(yīng)用較少。　　此外，聚乙二醇(PEG)、氰化鈣(CL)等化學(xué)試劑對(duì)抑制細(xì)胞分離，使染色體加倍也有一定的作用。　　物理法　　是在細(xì)胞分裂周期中施加物理因子處理，影響和干預(yù)細(xì)胞的正常分裂，達(dá)到染色體加倍的目的。常用的物理方法有溫度休克(包括高溫和低溫休克)和靜水壓休克等。　　溫度休克：其作用機(jī)制是溫度的變化引起細(xì)胞內(nèi)酶構(gòu)型的改變，不利于酶促反應(yīng)的進(jìn)行，導(dǎo)致細(xì)胞分裂時(shí)形成紡錘體所需的ATP的供應(yīng)途徑受阻，使已完成染色體加倍的細(xì)胞不能分裂。所用的溫度因種類(lèi)不同而有所差異。　　靜水壓：即利用專(zhuān)門(mén)的靜水壓設(shè)備產(chǎn)生的壓力施加于處理對(duì)象。其作用機(jī)制是抑制紡錘體的微絲和微管的形成，阻止染色體的移動(dòng)，從而抑制細(xì)胞的分裂，形成多倍體。　　此外，電脈沖也可誘導(dǎo)多倍體。　　生物法　　除了化學(xué)方法和物理方法外，采用貝類(lèi)遠(yuǎn)緣雜交也可培育多倍體(即生物方法)。但由于選種工作較復(fù)雜，這種方法在貝類(lèi)中還沒(méi)有應(yīng)用過(guò)，在魚(yú)類(lèi)上應(yīng)用則較多。太平洋牡蠣四倍體與二倍體交配成功地培育出了三倍體。　　四倍體(T)與二倍體(D)雜交生產(chǎn)貝類(lèi)三倍體，三倍體率可高達(dá)100％，該方法簡(jiǎn)單，操作方便，避免了理化處理對(duì)胚胎發(fā)育的影響，能提高胚胎的孵化率和幼蟲(chóng)的存活率，適合于生產(chǎn)性養(yǎng)殖。　　此外，利用四倍體與異種二倍體雜交，可產(chǎn)生異源三倍體。目前，太平洋牡蠣四倍體與近江牡蠣二倍體雜交已成功地培育出異源三倍體后代。（佚名）

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