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-------------------------------------------------------------------------------- 一、計劃任務及考核目標 (一)大豆有效成分提取加工技術研究 篩選出適合提取SOD的大豆(豆類)原料;研究提取大豆SOD的工藝;研 究選擇大豆SOD的檢測方法;研究大豆SOD的應用方法。大豆復合物SOD 的 活性定為30~50um/ml,或大豆SOD精品為1000~3000um/mg;大豆SOD 的理化指標和衛生指標符合國家規定;中試生產大豆SOD復合物50kg。 (二)吉林酸豆奶研究 選擇適合做酸豆奶的原料品種,確定最佳發芽時期,篩選和組合乳酸 菌群,確定發酵溫度和冷卻辦法。制成無豆腥味、酸甜適中、組織細膩的 酸豆奶,活菌數達到106~109個/ml。 篩選乳酸菌種,確定最佳發芽期。完成菌種認證和酸奶理化、衛生指 標檢測。組建中試室,達到每次生產1000瓶規模。 (三)高效價蛋白食品技術研究 選育耐高溫菌種。以大豆或豆渣為原料,通過少胞根霉的轉化,研制 高蛋白食品。 選育出耐高溫菌種。研制出高蛋白食品,粗蛋白得率大于55%,消化 吸收率大于67%。 (四)利用微生態益菌發酵大豆粉提取SOD研究 研究大豆粉在培養基中的比重對微生態益菌SOD產量的影響。 研究不 同溫度、pH值、通氧量及金屬離子加入量對益生態菌SOD產量的影響。 完 成SOD層析純化流程研究,研究不同破碎方法對菌細胞SOD活性和提取量的 影響及去除雜蛋白的方法研究。研究S OD活性保持技術,研究層析提取技 術及半衰期,確定減少影響SOD活性方法。 從微生物資源中篩選出高SOD含量菌株3~4株,每克菌SOD活性指標達 650um(NBT法)。完成SO D中試,生產出 SOD 純酶水劑, 活性為 1000 ~ 3000um/ml;粉劑1 g,活性為3000~5000um/ml。 二、計劃完成情況 (一)大豆有效成份提取加工技術研究 從140多個大豆品種中篩選出3個SOD含量較高、易提取的品種。 采用 中藥制劑的方法提取SOD。提取的大豆SOD,輔以“藥食同源”中藥,制成 保健型大豆SOD口服液,經動物試驗證明具有抗疲勞、抗衰老, 抗炎和提 高血液中SOD活性等功能。確定“NBT”法為檢測大豆SOD的主要方法。 經 解放軍301醫院檢測,大豆SOD口服液的SOD活性為162.3um/ml,保存半 年以上的大豆SOD口服液的活性為108.9um/ml;大豆SOD精品SOD 的活 性為190um/ml。 解決的關鍵技術 確定了NBT法(核黃素系統)為大豆SOD 的主要測活 方法,對該方法的各個環節都進行了仔細的探索和反復試驗,制定了一套 適合檢測大豆SOD活性的程序和方法,使用該方法檢測大豆SOD的活性結果 比較穩定。研究了一套適宜制備大豆SOD的工藝方法,解決了用動物血SOD 提取方法制備大豆SOD的成本高、得率低的問題,用該工藝提取大豆SOD活 性提高50%以上。用中藥制劑處理大豆SOD復合液,消除了大豆SOD復合液 中的絕大部分胰蛋白酶抑制劑。大豆制品中的胰蛋白酶抑制劑降低腸內胰 蛋白酶的有效活性,對胰腺分泌水平反饋抑制,對人體產生危害,傳統加 熱消降胰蛋白酶抑制劑的方法,使大豆SOD全部失活。 該研究采用中藥制 劑消除胰蛋白酶抑制劑,同時保留了大豆SOD活性。大豆SOD與動物血 SOD 一樣,是一種生物活性不穩定的酶,在自然條件下存放很容易失活,延長 產品的貨架期是生產SOD制品的關鍵,我們制成的大豆SOD復合液,在室溫 和自然光照條件下存放六個月,SOD活性損失不超過50%。 大豆SOD提取技術和大豆SOD口服液經世界聯機檢索和國內文獻檢索證 明,屬世界首創,大豆SOD口服液經動物試驗表明, 具有明顯的抗炎性, 抗疲勞、抗衰老功能,給予12小時內血液中SOD活性增高。 (二)吉林酸豆奶研究 選擇大豆高產品種為原料,最佳發芽期為芽長1cm。 選擇保加利亞 桿菌等混合菌群為發酵劑,該發酵劑需前期馴化。以發芽大豆為原料,輔 之以少量奶粉、糖等輔料作發酵底物,加入發酵劑后發酵,經過物理、化 學和生物學綜合方法處理,消除大豆有害因子和豆腥味。產品組織細膩, 呈乳白色,凝乳性佳,酸甜適口。含有豐富的氨基酸和礦物質。尤其該產 品含有豐富的SOD,能起到消除疲勞、抗衰老、抗炎的保健作用。 其中含 活菌數達到106/ ml以上。 完成產品的理化、 衛生指標檢測, 符合 GB2746-81標準。組建了中試室,其中發芽室6m3,發酵室12m3。每 次可以生產1000瓶以上。1991年8月向國家專利局申報了專利,1992年1月 公開。 解決的關鍵技術 篩選了適合豆芽酸奶制作的菌種。確定了作原料的 品種和發芽時期。確定了最佳底物配方。 (三)高效價蛋白食品技術研究 篩選、分離和鑒定了特定菌種RT-3。制成了風味較好的丹貝系列食品。 丹貝蛋白含量(干基)為54.1%。丹貝蛋白消化率為94.35%。 原料利用率 為80%,蛋白質得率為90%。 解決的關鍵技術 選育出耐高溫菌種RT-3,經認定是少胞根霉,能適 合丹貝發酵的基質高溫條件。研制出新型菌絲型發酵劑,解決了丹貝規模 生產時對發酵劑的要求。按規定程序對丹貝進行了系統的安全研究。并證 明安全無害。首次發現丹貝異黃酮及其生物活性,并建立丹貝異黃酮的快 速檢測法。采用高溫短時滅菌工序有效抑制了丹貝后加工過程中的品質劣 化問題。研究結果初步表明,發酵過程中隨菌絲的生長,分泌超氧化物歧 化酶(SOD),其效價達700um/g樣品,關于少胞根霉產生超氧化物歧化酶還 是第一次報告。 (四)利用微生態益菌發酵大豆提取SOD研究 已篩選菌株4個(活性達650u/g菌)。確定了大豆發酵底物配方,大豆 粉量為1.5%~3%。完成了提取工藝,得精品5g,活性為3800~4000um /mg 在櫻桃、草霉、蘋果、桃上進行了SOD應用試驗,可以提高果實SOD含 量15%~20%。 解決的技術關鍵 篩選了理想的菌種。確定了發酵底物配方。完成了 包括層析法、去雜蛋白法的全部工藝。采用粉狀于瓶中保存。 三、專家驗收評價意見 (一)從140多個大豆品種中篩選了三個SOD 含量較高的品種, 確定“ NBT”法為大豆SO D最佳檢測方法,完成了以“二法”處理大豆, 以中等 藥制劑為沉降劑相配套的大豆SOD提取工藝研究,使大豆SOD口服液活性達 到108um/ml。精品活性為190um/ml。在實驗室生產出大豆SOD復合物 50kg。 (二)研究確定了大豆發芽的最佳發芽期,篩選馴化了發酵劑,設計了 配方,制得的吉林酸豆奶消除了豆腥味,活菌數達到106個/ml以上,并 含有SOD。該技術通過農業部鑒定。 (三)研究篩選、鑒定了特定菌種RT-3,制成了風味較好的丹貝食品, 其消化率為94%,原種利用率為80%。建立了免疫檢測系統,并首次證明 產品中含有異黃酮和SOD。該技術通過部鑒定。 (四)利用微生態益菌發酵大豆粉提取SOD研究篩選了菌株4個,確定了 配方,提取精品5g,活性達到3800~4000um/mg,并在櫻桃等4種果樹 上應用,使果實中SOD含量提高15%~20%。 專題共開發新產品7項,研究新技術新工藝10項,申報專利4項,獲專 利3項,通過鑒定2項,撰寫研究論文40篇。簽訂技術轉讓合同9份, 成交 額74萬元,綜合經濟效益達600萬元。 專題主持單位:吉林省農科院 專題參加單位:南京、北京農業大學( 佚名)
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